FM4-64 是一种广泛用于膜电位和膜动力学研究的活性荧光探针，其化学结构为氨基或季铵盐取代的苯并噻唑类染料，具有亲脂性尾部和荧光染料核心。

化学结构与特性

荧光核心

FM4-64 的核心染料结构为苯并噻唑或类似罗丹明的氮杂环体系，经过改造后具有强烈的红色/远红发射光谱。其吸收峰约在 515–560 nm，发射峰约在 640–700 nm，量子产率高，光稳定性好，即使在长时间激光激发下，也能保持稳定的荧光信号。

亲脂性尾部

FM4-64 分子带有长链烷基或脂溶性基团，能够嵌入细胞膜脂质双层，使染料紧密结合于膜表面。其亲脂性特征保证了染料在膜上的高度定位性，并在膜电位变化或膜动态事件中能够实时响应。

膜电位敏感性

FM4-64 属于电压敏感荧光探针，可随着膜电位的改变发生荧光强度或光谱微调反应，从而实现膜电位的动态监测。染料本身对膜环境的极性和电荷敏感，可用于研究膜电位变化及膜相关过程。

英文名 FM4-64

CAS号 162112-35-8

分子量 607.50600

分子式 C30H45Br2N3

应用领域

膜电位研究

FM4-64 可用于测定细胞膜电位的变化，结合膜电压敏感实验技术，研究神经元、心肌细胞及其他电活性细胞的膜电位动态。

内吞与囊泡循环研究

通过 FM4-64 的膜嵌入特性，可追踪囊泡内吞、转运及囊泡融合过程，广泛应用于神经科学、细胞生物学和膜动力学研究。

膜流动性和结构研究

FM4-64 可用于研究膜脂双层的流动性、微区分布及膜重排行为，通过荧光强度变化和光谱响应分析膜环境变化。

多色荧光联合实验

由于发射波长在远红区域，FM4-64 可与 GFP、CFP、YFP 等绿色或蓝色荧光蛋白结合使用，实现多色成像和复杂细胞过程的观察。

实验注意事项

储存与溶解性

建议 FM4-64 干粉在 -20°C 避光干燥保存，避免反复冻融。可溶于 DMSO 或乙醇制备储备液，使用前稀释于培养基或缓冲液。

使用浓度

常用工作浓度在 1–10 μM 范围内，应根据细胞类型和实验目的优化，以避免染料积累过多造成光毒性或膜功能干扰。

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